11: Експресія генів
- Page ID
- 6449
\( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)
- 11.1: Вступ
- ДНК була описана як молекула, що складається з 2 антипаралельних ниток в подвійній спіралі Френсісом Криком і Джеймсом Уотсоном. Елегантна модель ілюструвала внутрішню надмірність, яка зробила ДНК підходящим посудиною для зберігання даних для генетичної інформації. Пізніше Френсіс Крик висловив уявлення про те, як ця інформація перейшла від зберігання до фактичної програми, яка запускає клітини. Крік спочатку позиціонував це як «гіпотезу послідовності». Ця ідея інформаційного потоку називається Центральною догмою молекулярної біології.
- 11.2: Прокаріотична транскрипція
- Глюкоза є кращим джерелом енергії клітин. Франсуа Якоб і Жак Монод прагнули зрозуміти, як бактерії приймають рішення про перемикання між різними цукрами як джерелами енергії. Якоб і Монод виявили, що якби глюкоза та лактоза були представлені як їжа для бактерій, існувала б двофазна картина росту. Монод виявив, що коли лактоза була єдиним цукром, експресія ферменту β-галактозидази була індукована і демонструвала монофазний ріст із затримкою.
- 11.3: РНК мініпреп (активність)
- Очищення РНК відбувається аналогічно препаратам ДНК. Використовується колонка на основі кремнію, де ДНК виключається з зв'язування залежно від розміру та через додатковий етап перетравлення ДНК з використанням ферменту ДНКАзи I. РНК надзвичайно крихка і схильна до деградації. Таким чином, окремі піпетки і пластмаси зазвичай використовуються в лабораторіях для зменшення кількості впливу навколишнього середовища або експериментальної РНК. Ця сторінка містить інструкції про те, як підготувати РНК і виконати зворотну транскрипцію еукаріотичної мРНК
- 11.4: Кількісне вимірювання нуклеїнової кислоти
- Вимірювання можуть проводитися окремих генів, що цікавлять, за допомогою ПЛР цих специфічних генів. Процес, відомий як ПЛР у реальному часі або кількісна ПЛР (qPCR), використовується для вимірювання окремих генів за допомогою вимірювань флуоресценції. Інтеркаляційний агент, який зв'язується лише з дволанцюговою ДНК під назвою Sybr Green, використовується в машині QPCR, яка вимірює флуоресценцію після кожного циклу ПЛР побічно вказує на кількість ампліфікованого продукту.
- 11.5: Еукаріотична транскрипція
- На відміну від прокаріотичних генів, експресія генів в еукаріотичних клітині має складні системи транскрипційних факторів, які діють на промотори для набору РНК-полімераз. Крім того, enhancer елементи можуть перебувати багато кілобаз вище за течією промоутера. Ці підсилювачі підсилюють транскрипцію гена. У цьому випадку протеїни-активатори транскрипції або транс-активатори підсилюють промоторну активність.