3.4: Кількісне виявлення білка (активність)

Last updated

Oct 24, 2022
Save as PDF
- 3.3: Вивчення закону пива (віртуальний)
- 3.5: Кількісне виявлення білків (SpectroVis Plus)

$\newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} }$

$\newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}}$

$\newcommand{\id}{\mathrm{id}}$

$\newcommand{\Span}{\mathrm{span}}$

$\newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}$

$\newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}$

$\newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}$

$\newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}$

$\newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}$

$\newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}$

$\newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}$

$\newcommand{\Span}{\mathrm{span}}$

$\newcommand{\id}{\mathrm{id}}$

$\newcommand{\Span}{\mathrm{span}}$

$\newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}$

$\newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}$

$\newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}$

$\newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}$

$\newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}$

$\newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}$

$\newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}$

$\newcommand{\Span}{\mathrm{span}}$

Експериментальний фон

Бичачий сироватковий альбумін (BSA) - це білок, який циркулює в крові корів. Очищений БСА може бути використаний з розчином Biuret в серійних розведеннях для створення стандартної кривої. Стандартна крива проілюструє взаємозв'язок між концентрацією (залежною змінною) і поглинанням при 540 нм (незалежна змінна). Потім ми можемо використовувати цю криву для оцінки концентрації невідомих зразків.

1. На графіку ви пам'ятаєте, яка вісь є залежною, а яка незалежна змінна?

2. У наведеній нижче таблиці ви можете визначити, які зразки є негативним контролем, а які є позитивними контролями?

3. Що таке прогноз поглинання або інтенсивності кольору різних трубок?

Розбавити стандарти BSA

Етикетка 9 туб 1-9.
Об'єднайте компоненти наведеної нижче таблиці для отримання відповідної концентрації розчинів.

Помістіть трубку 1 (заготовку) в кювету і виміряйте поглинання (А) в спектрофотометрі при 540 нм.
Калібруйте спектрофотометр, щоб зчитувати 0 при А _{540 нм}.
Послідовно зчитуйте кожен зразок на _540nm і запишіть значення в таблиці нижче.

Побудуйте кожне розведення BSA в програмі електронних таблиць, як Excel, як розсіювач.
Створіть найбільш підходящу лінію для цих стандартів за допомогою рівняння прямої.
Використовуйте рівняння лінії для оцінки концентрації невідомого зразка.

Підгонка кривої

Запустіть моделювання нижче, щоб зрозуміти, як ви можете використовувати стандартну серію розведення для оцінки концентрації зразків.

Клацніть на зображенні вище, щоб розпочати моделювання підгонки кривої.

Розсіювач Plot Підручник

Використовуйте підручник нижче і дивіться на 1,25X, щоб побудувати власні дані.