2.3: Додаток III- Використання Nanodrop

Last updated
Save as PDF

Page ID: 7001

Nathan Reyna, Ruth Plymale, & Kristen Johnson
Ouachita Babtist University & University of New Hampshire

\( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)

Як користуватися NanoDrop

Перегляньте відео YouTube щодо питань для NanoDrop.

(https://www.youtube.com/watch?v=y3ICiycWeCA&t)

NanoDrop дозволяє вимірювати концентрацію ДНК, РНК і білка в парі мікролітрів розчину. Найкраще використовувати 1,5 - 2\(\mu L\)\(\mu L\) для точних вимірювань. Деякі моделі мають можливість вимірювати флуоресцентно позначені молекули.

Порядок дій:

Вимийте п'єдестал NanoDrop. Підніміть верхню частину плеча NanoDrop і зніміть серветку.
Додайте 4−5\(\mu L\) очищеної води на нижній п'єдестал, потім опустіть руку.
Зачекайте 30-60 секунд.
Підніміть верхню руку і використовуйте серветку, щоб енергійно вичистити як верхню, так і нижню тумби.
Відкрийте програмне забезпечення NanoDrop на комп'ютері, двічі клацнувши значок «ND-1000», який трохи нагадує пісочний годинник
Ініціалізація NanoDrop:
Натисніть кнопку «Нуклеїнова кислота» в програмному забезпеченні NanoDrop. Це відкриває діалогове вікно; НЕ натискайте «гаразд», поки ви не додасте воду.
Додайте 2\(\mu L\) очищеної води на нижній п'єдестал, потім опустіть верхнє плече.
Натисніть «добре» на комп'ютері і зачекайте близько 20 секунд, поки NanoDrop ініціалізується
Коли це буде зроблено, підніміть верхню частину руки і висушіть її серветкою
Порожній NanoDrop:
Додайте 2\(\mu L\) буфера, в якому знаходиться ваш зразок (швидше за все, буфер елюції).
Опустіть верхню частину плеча NanoDrop і натисніть кнопку «Blank» на програмному забезпеченні.
Зачекайте близько 20 секунд, поки буде зроблено вимірювання заготовки.
Підніміть верхню частину руки і висушіть п'єдестал серветкою
Виміряйте свій зразок:
Додайте 2\(\mu L\) зразка на нижній п'єдестал, а потім опустіть верхню руку.
У полі «Ідентифікатор зразка» введіть назву вашого зразка.
Натисніть кнопку «Виміряти» на програмному забезпеченні і зачекайте близько 20 секунд, поки вимірювання буде завершено.
Підніміть верхню руку і висушіть п'єдестал АБО підніміть верхню руку і обережно підніміть якомога більше зразка, як ви можете зберегти для подальшого використання.
Збір даних:
Запишіть будь-які вимірювання, які вас цікавлять.
Натисніть кнопку «Print Screen», щоб надрукувати повний спектр при бажанні.
Закінчивши робити всі виміри, натисніть «Друк звіту», щоб отримати таблицю всіх даних.
Очищення п'єдесталу:
Додайте 4-5\(\mu L\) очищеної води на нижній п'єдестал, потім опустіть руку.
Зачекайте 30-60 секунд.
Підніміть верхню частину руки і використовуйте серветку, щоб енергійно вичистити як верхню, так і нижню тумби.
Помістіть нову складену лабораторну серветку на нижній п'єдестал і закрийте верхню руку.
Вимкніть і закрийте комп'ютер NanoDrop.

Більше інформації про те, що означають ці значення NanoDrop:

https://tools.thermofisher.com/content/sfs/brochures/T123-NanoDrop-Lite-Interpretation-of-Nucleic-Acid-260-280-Ratios.pdf