14: SDS-СТОРІНКИ
Ця лабораторія познайомить вас з SDS-PAGE, простим і недорогим методом розчинення білків у складних сумішах.
Гелі SDS-PAGE забезпечують вихідні матеріали для західних плям і для деяких протеомних методів. У цій лабораторії ви будете
використовувати SDS-PAGE для аналізу білкових екстрактів, які ви приготували з дріжджових штамів, надмірно експресуючих
білки злиття Met і LacZ.
Цілі
Наприкінці цієї лабораторії студенти зможуть:
- обговорити принципи, які регулюють поділ білка на переривчастих гелі SDS- PAGE.
- відливати і запускати гелі SDS-PAGE.
- проаналізуйте візерунок смуг на вітражному гелі SDS-PAGE
- оцінка молекулярної маси білка від його міграції на гелі SDS-PAGE
Ця лабораторія познайомить вас з SDS-PAGE (додецилсульфат натрію - електрофорез поліакриламідного гелю), простим і недорогим методом розчинення білків в складних сумішах. Ви будете використовувати SDS-PAGE гелі для аналізу дріжджових білкових екстрактів, які ви підготували в останній лабораторії. Кожна команда зробить по два гелі. Один гель буде забарвлений Simply Blue, щоб візуалізувати всі про-тейни в екстрактах. Другий гель буде використовуватися для західних плям (Глава 15), які будуть специфічно виявляти синтезовані білки Met і LacZ в екстрактах.