12.10: Підсумок глави та ключові терміни

Резюме глави

Хроматографія і електрофорез - це потужні аналітичні методи, які як розділяють зразок на його компоненти, так і забезпечують засіб для визначення концентрації кожного компонента. Хроматографічні поділи використовують селективне поділ компонентів зразка між стаціонарною фазою, яка іммобілізується всередині колони, і рухомою фазою, яка проходить через колону.

Ефективність хроматографічного поділу описується роздільною здатністю між двома хроматографічними смугами і є функцією коефіцієнта утримання кожного компонента, ефективності колонки та селективності колонки. Коефіцієнт утримання розчиненої речовини - це міра його поділу на стаціонарну фазу, з більшими коефіцієнтами утримання, що відповідають більш сильно затриманим розчиненим речовинам. Селективність колони для двох розчинених речовин - це співвідношення їх коефіцієнтів утримання, що забезпечує відносну міру здатності колони утримувати два розчинені речовини. Ефективність колонки враховує ті фактори, які призводять до збільшення ширини хроматографічної смуги розчиненого речовини під час поділу. Ефективність колонки визначається з точки зору кількості теоретичних пластин і висоти теоретичної пластини, остання з яких є функцією ряду параметрів, особливо швидкості потоку рухомої фази. Хроматографічні поділи оптимізуються за рахунок збільшення кількості теоретичних пластин, за рахунок збільшення селективності колони або за рахунок збільшення коефіцієнта утримання розчиненої речовини.

У газовій хроматографії рухома фаза являє собою інертний газ, а стаціонарна фаза - неполярна або полярна органічна рідина, яка або покрита на твердому матеріалі і упакована в колону з широким отвором, або покрита на стінках вузькопрохідної капілярної колони. Газова хроматографія корисна для аналізу летючих компонентів.

У високоефективній рідинній хроматографії рухома фаза - це або неполярний розчинник (нормальна фаза), або полярний розчинник (зворотна фаза). Стаціонарна фаза протилежної полярності, яка скріплена з твердим матеріалом, упаковується в колону з широким отвором. ВЕРХ застосовується до більш широкого спектру зразків, ніж GC; однак ефективність поділу для ВЕРХ не така хороша, як для капілярної ГК.

Разом на ГК і ВЕРХ припадає найбільша кількість хроматографічних поділів. Інші методи поділу, однак, знаходять спеціальне застосування: особливе значення мають іонообмінна хроматографія для поділу аніонів і катіонів; хроматографія з виключенням розмірів для відділення великих молекул; і надкритична рідинна хроматографія для аналізу зразків, які не легко аналізується ГК або ВЕРХ.

При електрофорезі капілярної зони компоненти зразка відокремлюють виходячи з їх здатності рухатися через провідне середовище під впливом прикладеного електричного поля. Позитивно заряджені розчинені речовини елітуть спочатку, з меншими, більш сильно зарядженими катіонами, що елютують перед більшими катіонами нижчого Нейтральні види елютують, не піддаючись подальшому поділу. Нарешті, аніони елітують останніми, причому менші, більш негативно заряджені аніони є останніми, хто елітує. Додаючи поверхнево-активну речовину, нейтральні види можна розділити за допомогою міцелярної електрокінетичної капілярної хроматографії. Електрофоретичні виділення також можуть скористатися здатністю полімерних гелів розділяти розчинені речовини за розміром (капілярний гель електрофорез), і здатність розчинених речовин до поділу в стаціонарну фазу (капілярна електрохроматографія). У порівнянні з ГК і ВЕРХ капілярний електрофорез забезпечує більш швидке і ефективне виділення.

Ключові умови

скоригований час утримання ширина базової лінії капілярна колонка капілярний гель електрофорез хроматографія кріогенне фокусування швидкість електроосмотичного потоку електрофорез межа виключення газової хроматографії загальна проблема елюції відбір проб обмеження включення ізократична елюція Індекс утримання Ковата контур інжектора масовий перенесення рухлива фаза нерастаціоновані розчинні речовини відкрита трубчаста колона пікова потужність пористо-шарова відкрита трубчаста колона коефіцієнт утримання коефіцієнт вибірковості спліт ін'єкції стаціонарна фаза хвостик детектор теплопровідності настінна відкрита трубчаста колона

адсорбційна хроматографія кровоточу капілярна електрохроматографія електрофорез капілярної зони стовпчаста хроматографія електрокінетична ін'єкція детектор захоплення електронів електрофоретична рухливість датчик іонізації полум'я газо-рідинна хроматографія охоронна колона високоефективна рідинна хроматографія іонообмінна хроматографія ізотермічний рідинно-тверда адсорбційна хроматографія мас-спектрометр міцелла монолітна колона нормально-фазова хроматографія упаковані стовпці планарна хроматографія чистка і пастка час утримання одноколонкова іонна хроматографія безрозрізна ін'єкція надкритична рідинна хроматографія програмування температури Рівняння Ван Демтера дзета-потенціал

розширення смуги скріплена стаціонарна фаза капілярний електрофорез хроматограма вилучення протитечії електроосмотичний потік електроферограма електрофоретична швидкість фронтальна газово-тверда хроматографія елюація градієнта гідродинамічне уприскування колонка придушувача іонів Джоуль нагрів поздовжня дифузія масовий спектр міцелярна електрокінетична капілярна хроматографія кілька шляхів впорскування на колонці перегородкова хроматографія індекс полярності резолюція зворотно-фазова хроматографія твердофазна мікроекстракція укладання відкрита трубчаста колона з опорним покриттям теоретична табличка порожнеча час