1.8: Загальне правило коліформи

Цілі навчання

• Поясніть біоплівки
• Поясніть поширені мікробіологічні методи
• Окреслити та описати бактеріальний аналіз кишкової палички

Загальні мікробіологічні методи

Біоплівки

У природі мікроорганізми не живуть ізольовано, як правило. Вони живуть в спільнотах, які називаються біоплівками. Сьогодні за допомогою конфокальної мікроскопії видно тривимірні структури біоплівок. Біоплівки знаходяться в матриці переважно полісахаридів, що містять ДНК і білки, звані слизом. Біоплівкою прийнято вважати гідрогель, який представляє собою складний полімер, що містить багато разів його суху масу у воді. Хімічна комунікація клітина-клітина, або зондування кворуму, дозволяє бактеріям координувати свою діяльність та об'єднуватися в спільноти, які надають переваги, такі як багатоклітинний організм. Біоплівки - це бактеріальні шламові шари і біологічні системи. Бактерії організовані в скоординоване функціональне співтовариство. Біоплівки кріпляться до поверхонь. Бактеріальне співтовариство може бути окремим видом або різноманітною групою мікроорганізмів. Біоплівки можуть з'являтися і в інших формах. Прикладом може служити зграя, яка утворюється в очисних спорудах. У швидкоплинних потоках біоплівки можуть утворювати ниткоподібні стримери. У межах спільноти біоплівки бактерії здатні ділитися поживними речовинами та захищатися від шкідливих факторів навколишнього середовища. Безпосередня близькість мікроорганізмів всередині біоплівки має перевагу полегшення передачі генетичної інформації шляхом кон'югації.

Біоплівка починає утворюватися, коли вільно плавають бактерії, планктонічні, прикріплюються до поверхні. Якби бактерії росли в рівномірно товстому моношарі, вони стали б переповнені, поживні речовини не були б доступні в нижній глибині, а токсичні відходи накопичувалися б. Мікроорганізми в біоплівкових спільнотах уникають цих проблем, утворюючи стовпоподібні структури з каналами між ними, так що вода може переносити вхідні поживні речовини до клітин і переносити вихідні відходи подалі від клітин. Це являє собою примітивну кровоносну систему. Окремі мікроби і скупчення слизу періодично залишають встановлену біоплівку і переміщаються на нове місце, де біоплівка стає витягнутою. Така біоплівка, як правило, складається з поверхневого шару товщиною близько 10 мкм, зі стовпами, що досягають 200 мкм над поверхнею.

Мікроорганізми в біоплівках можуть працювати спільно для виконання складних завдань. Біоплівки є важливими елементами в системах очищення стічних вод, і вони можуть бути проблемою в трубах і трубах, де їх скупчення перешкоджають потоку води.

Культура Медіа

Живильний матеріал, підготовлений для росту мікроорганізмів в лабораторії, називається культуральним середовищем. Деякі бактерії можуть добре рости на будь-якому живильному середовищі, а інші бактерії вимагають спеціальних середовищ. Інші бактерії не можуть рости на жодному неживому середовищі. Мікроби, які вводяться в культуральне середовище для ініціації росту, називаються інокулятом. Мікроби, які ростуть і розмножуються в культурному середовищі або на ньому, називаються культурою.

Для росту мікроорганізмів в лабораторії доступні найрізноманітніші середовища. Ці середовища мають попередньо змішані компоненти і вимагають лише додавання води з подальшою стерилізацією. Медіальні постійно розробляються або переглядаються для використання у виділенні та ідентифікації бактерій, які представляють інтерес для дослідників у таких галузях, як їжа, вода та клінічна мікробіологія.

Коли бажано вирощувати бактерії на твердому середовищі, в середу додають застигаючий засіб типу агару. Складний полісахарид, отриманий з морської водорості, агар здавна використовується як загущувач в таких продуктах, як желе і морозиво.

Агар медіальний міститься в пробірках або чашках Петрі. Пробірки називаються похилими, коли їх вмісту дають затвердіти всередині пробірки, що утримується під кутом, щоб була доступна велика площа поверхні для росту. Коли агар застигає в вертикальній трубці, його називають глибоким. Чашки Петрі - це неглибокі тарілки з кришкою, яка гніздиться над дном для запобігання забруднення. Коли чашка заповнена, її називають тарілками Петрі.

Малюнок\(\PageIndex{1.1}\): Зображення CDC/Dr. David Berd знаходиться у відкритому доступі

Малюнок\(\PageIndex{1.2}\): Зображення Карла Аза ліцензовано відповідно до CC BY 4.0

Хімічно визначене середовище

Для підтримки росту мікробів середовища забезпечують джерелами енергії, а також джерелами вуглецю, азоту, сірки, фосфору та будь-яких органічних факторів росту, які організм не в змозі синтезувати. Хімічно визначене середовище - це те, де відомий точний хімічний склад середовища. Для хемогетеротрофного мікроорганізму хімічно визначене середовище містить органічні фактори росту, які служать джерелом вуглецю та енергії. Наприклад, глюкоза включена в середовище для вирощування хемогетеротрофної кишкової палички.

Організми, які вимагають багатьох факторів росту, описуються як вибагливі. Організми такого типу, як лактобактерії, іноді використовуються в тестах, що визначають концентрацію того чи іншого вітаміну в речовині. Для проведення мікробіологічного аналізу готується середовище для росту, яке містить всі потреби в зростанні бактерій, крім вітаміну, що досліджується. Потім середовище, досліджувана речовина та бактерії поєднуються, і вимірюється ріст бактерій. Ріст бактерій, який відбивається на кількості виробленої молочної кислоти, буде пропорційний кількості вітаміну в досліджуваному речовині. Чим більше молочної кислоти, тим більше клітин лактобактерій, які здатні рости, тим більше вітаміну, який присутній.

Комплекс Медіа

Хімічно визначене середовище зазвичай зарезервовано для лабораторних експериментальних заходів або для росту автотрофних бактерій. Більшість гетеротрофних бактерій і грибів вирощуються на складних середовищах, що складаються з поживних речовин, включаючи екстракти з дріжджів, м'яса або рослин, або перетравлення білків з цих джерел. Точний хімічний склад дещо змінюється від партії до партії.

У складних середовищах потреби в енергії, вуглеці, азоті та сірці зростаючих мікроорганізмів забезпечуються білком. Білок - це велика, нерозчинна молекула, яку меншість мікроорганізмів може використовувати безпосередньо; однак часткове перетравлення білків кислотами або ферментами зменшує білок до коротших ланцюгів амінокислот, які називаються пептонами. Ці дрібні розчинні фрагменти можуть бути перетравлені бактеріями.

Малюнок\(\PageIndex{2.1}\): Зображення від Ninjatacoshell ліцензовано відповідно до CC BY-SA 3.0

Малюнок\(\PageIndex{2.2}\): Зображення NASA знаходиться у відкритому доступі

Малюнок\(\PageIndex{2.3}\): Зображення CDC знаходиться у відкритому доступі

Вітаміни та інші органічні фактори росту забезпечуються м'ясними екстрактами або дріжджовими екстрактами. Розчинні вітаміни та мінерали з м'яса або дріжджів розчиняються у екстракційній воді, яка випаровується так, що фактори концентруються. Якщо складне середовище знаходиться в рідкому вигляді, його називають живильним бульйоном. При додаванні агару його називають живильним агаром.

Анаеробні середовища росту і методи

Вирощування анаеробних бактерій становить особливу проблему. Оскільки анаероби можуть бути вбиті під впливом кисню, необхідно використовувати спеціальні середовища, звані відновлювальними середовищами. Ці середовища містять інгредієнти, такі як тіогліколат натрію, які хімічно з'єднуються з розчиненим киснем і виснажують кисень у культуральному середовищі. Щоб регулярно вирощувати і підтримувати чисті культури облігатних анаеробів, мікробіологи використовують відновлювальні середовища, що зберігаються в звичайних, щільно закритих пробірках. Ці середовища нагріваються незадовго до використання, щоб видалити поглинений кисень.

Коли культури необхідно вирощувати в тарілках Петрі для спостереження за окремими колоніями, лабораторії використовують системи, що інкубують мікроорганізми в герметичних коробках і банках, в яких кисень хімічно видаляється після внесення культуральних пластин і герметизації ємності.

Малюнок\(\PageIndex{3}\): Бульйон поживних речовин - зображення від LibreTexts ліцензовано відповідно до CC BY-SA 3.0

Спеціальні методи культури

Багато бактерій не були успішно вирощені на штучних лабораторних середовищах. Mycobacterium leprae, паличка прокази, вирощується в броненосці, які мають відносно низьку температуру тіла, що відповідає вимогам мікроба. За рідкісним винятком облігатні внутрішньоклітинні бактерії, такі як рикетсія і хламідіоз, не ростуть на штучних середовищах. Віруси можуть розмножуватися тільки в живій клітині господаря, а також. Для виділення цих типів організмів застосовуються спеціальні методики.

Вибіркове та диференціальне середовище

Часто необхідно виявити наявність специфічних мікроорганізмів, пов'язаних із захворюванням або поганою санітарією. Для цього завдання використовуються селективні і диференціальні середовища. Селективне середовище покликане придушити ріст небажаних бактерій і стимулювати зростання потрібного мікроба. Агар сульфіт вісмуту - це середовище, яке використовується для виділення бактерії черевного тифу, грамнегативної Salmonella typhus, з калу. Сульфіт вісмуту пригнічує грампозитивні бактерії та більшість грамнегативних кишкових бактерій. Декстрозний агар Сабуро, має рН 5,6, і він використовується для виділення грибів, які переростають бактерії при цьому рН.

Диференціальне середовище дозволяє легше відрізнити колонії потрібного організму від інших колоній, що ростуть на одній платівці. Чисті культури мікроорганізмів мають ідентифіковані реакції з диференціальними середовищами в пробірках або на пластин. Агар крові використовується для виявлення видів бактерій, що руйнують еритроцити. Ці види, такі як стрептококи, показують чітке кільце навколо своїх колоній, де вони лізували навколишні клітини крові.

Селективні і диференціальні характеристики об'єднані в одному середовищі. При виділенні бактерій Staphylococcus aureus відомо, що цей організм має толерантність до хлориду натрію і що він ферментує вуглеводний маніт з утворенням кислоти. Агар солі манітолу містить 7,5% хлориду натрію, який перешкоджає росту конкуруючих організмів і середовища вибирає для S. aureus. Медіа також містить показник рН, який змінює колір, якщо манітол в середовищі ферментований до кислоти. Бродильні колонії манітолу S. aureus диференціюються від колоній бактерій, які не бродять маніт. Бактерії, які ростуть в концентраціях солі і бродять маніт до кислоти, ідентифікуються за зміною кольору, і вони є колоніями S. aureus. Використання диференціальних середовищ може бути використано для ідентифікації токсину, що продукує кишкову паличку, також.

Культура збагачення

Бактерії в невеликій кількості можуть бути пропущені, особливо якщо інші бактерії присутні в більшій кількості. З цієї причини необхідно використовувати культуру збагачення. Ця методика використовується особливо для зразків ґрунту та фекалій. Середовище для культури збагачення є рідким і забезпечує поживні речовини та умови навколишнього середовища, які сприяють зростанню конкретного мікроба, а не інших мікробів. Це селективне середовище в цьому сенсі. Він призначений для збільшення невеликої кількості потрібного типу організму до виявлених рівнів. Методика включає розміщення зразка в рідке середовище збагачення, яке сприяє видам, які бажано виділити. Культурному середовищі дають висиджуватися протягом декількох днів, а потім невелика його кількість перекладають в іншу колбу цього ж середовища. Після серії перенесень, що вижила популяція буде складатися з бактерій, здатних метаболізувати інгредієнти в середовищі. Бактерії дають час, щоб рости в середовищі між перенесеннями. Цей процес є етапом збагачення. Будь-які мікроби в оригінальному інокуляті швидко розріджуються з послідовними перенесеннями. При останньому розведенні прожилок на тверде середовище того ж складу, тільки колонії потрібних організмів здатні використовувати спеціальні інгредієнти для зростання.

Чисті культури

Більшість зразків включають кілька різних видів бактерій. Якщо ці зразки будуть нанесені на поверхню твердого середовища, утворюються колонії, які є точними копіями вихідного організму. Видима колонія теоретично походить від однієї спорової або вегетативної клітини або з групи однакових мікроорганізмів, прикріплених один до одного грудочками або ланцюгами. Мікробні колонії часто мають характерний зовнішній вигляд, який відрізняє одного мікроба від іншого виду. Бактерії повинні бути розподілені досить широко на тарілці, щоб колонії були помітно відокремлені від інших мікробних видів.

Малюнок\(\PageIndex{4}\): Смуга пластини чистих культур — Зображення Білла Бренсона знаходиться у відкритому доступі

Більшість досліджень мікробів вимагають чистої культури або клонів бактерій. Метод ізоляції, який використовується для досягнення чистих культур, - це метод смугової пластини. Стерильну інокуляційну петлю занурюють в змішану культуру, яка містить більше одного виду мікробів, і вона розшаровується по малюнку по поверхні живильного середовища. У міру промальовування малюнка бактерії протираються з петлі на засіб. Останні клітини, які потрібно стерти з петлі, знаходяться досить далеко один від одного, щоб перерости в ізольовані колонії. Ці колонії можна підібрати за допомогою інокуляційної петлі і перенести в пробірку для живильного середовища з утворенням чистої культури, що містить тільки один вид бактерій.

Смугасті пластинчасті методи добре працюють, коли організм для виділення присутній у великій кількості щодо загальної популяції. Коли мікроб, який потрібно ізолювати, присутній у невеликій кількості, його кількість повинна бути збільшена шляхом селективного збагачення, перш ніж його можна буде ізолювати методом смугової пластини.

Коліформний бактеріальний аналіз

Скидання відходів з комунальної каналізації є одним з найважливіших питань якості води. Особливе значення він має для джерел питної води. Міські стічні води містять людські фекалії і води, забруднені цими стоками, можуть містити патогенні (хвороботворні) організми і, отже, можуть бути небезпечними для здоров'я людини, якщо їх використовувати в якості питної води або при приготуванні їжі. Калове забруднення води регулярно виявляється за допомогою мікробіологічного аналізу.

Недоцільно намагатися рутинної ізоляції патогенів, оскільки вони присутні у відносно невеликій кількості порівняно з іншими типами мікроорганізмів. Більш того, існує безліч видів збудника, і кожен організм вимагає унікальної мікробіологічної методики виділення. Прийнятий підхід полягає в аналізі зразків індикаторних організмів, які населяють кишечник і виводяться з фекаліями людини. Наявність цих індикаторних організмів у воді є свідченням того, що є забруднення фекалами, і існує ризик наявності патогенних мікроорганізмів.

Якщо індикаторні організми присутні у великій кількості, зараження вважається недавнім та/або важким. Бактерії у воді, як правило, присутні не окремо, а як згустки або пов'язані з твердими частинами. При перерахуванні бактерій у воді підраховується не кількість окремих бактерій, а кількість скупчень бактерій або частинок та пов'язаних з ними бактерій. Кожна грудка або частка може мати багато бактерій, пов'язаних з ним.

Всього коліформ

Термін тотальні кишкові палички відноситься до великої групи грамнегативних, стрижнеподібних бактерій, які мають кілька характеристик. До групи належать термостійкі кишкові палички і бактерії фекального походження, а також деякі бактерії, які можуть бути виділені з джерел навколишнього середовища. Наявність загальних коліформ може вказувати, а може і не вказувати на забруднення фекалом. В крайньому випадку висока кількість для загальної групи кишкової палички може бути пов'язана з низьким, або нульовим, підрахунком для термостійких коліформ. Результат такого характеру не обов'язково вказував би на наявність фекального забруднення. Це може бути викликано потраплянням ґрунту або органічної речовини у воду або умовами, придатними для росту інших видів кишкової палички. У лабораторії загальні кишкові палички вирощують в або на середовищі, що містить лактозу, при температурі 35 або 37 °С, які умовно ідентифікуються за отриманням кислоти і газу з ферментації лактози.

Термін фекальна кишкова паличка використовується в мікробіології води для позначення організмів кишкової палички, які ростуть при 44 або 44,5 С і бродять лактозу для отримання кислоти та газу. На практиці деякі організми з цими характеристиками можуть не мати фекального походження, і термін термостійка кишкова паличка, отже, є більш правильним і стає все більш поширеним. Проте наявність термостійких кишкових паличок майже завжди свідчить про забруднення фекалом.

Зазвичай більше 95 відсотків термостійких кишкових паличок, виділених з води, є кишковим організмом Escherichia coli, наявність якого є остаточним доказом фекального забруднення. Як результат, часто не потрібно проводити подальше тестування для підтвердження специфічної присутності кишкової палички.

Наявність фекальних стрептококів є свідченням фекального зараження. Калові стрептококи, як правило, довше зберігаються в навколишньому середовищі, ніж термос-толерантні або загальні кишкові палички і мають високу стійкість до висихання. Тому можна виділити фекальні стрептококи з води, яка містить мало або не містить термостійких коліформ, як, наприклад, коли джерело забруднення віддалене у часі або просторі від точки відбору проб. Фекальні стрептококи ростуть в або на середовищі, що містить азид натрію, при температурі 37-44 °С, зазвичай виявляються відновленням барвника (тетразолійвмісної сполуки) або гідролізом ескуліну. Звичайні методи можуть дати помилкові спрацьовування і можуть знадобитися додаткові підтверджуючі тести.

Гетеротрофний підрахунок пластин

Кількість гетеротрофних пластин включає всі мікроорганізми, які здатні рости в або на багатій поживними речовинами твердому агаровому середовищі. Використовуються дві інкубаційні температури і час. Вони становлять 37° C протягом 24 годин, щоб стимулювати ріст бактерій походження ссавців, і 22° C протягом 72 годин для перерахування бактерій, отриманих головним чином з джерел навколишнього середовища. Основна цінність підрахунку колоній полягає в порівнянні результатів повторних зразків з одного і того ж джерела. Якщо рівні значно збільшуються від нормальних значень, може існувати привід для занепокоєння.

Вибір бактеріологічної аналітичної техніки

Для виявлення наявності коліформ у воді зазвичай використовуються дві методики. Перша методика називається багаторазовою ферментаційною трубкою або найбільш ймовірною технікою чисел. При цьому способі виміряні частини проби води поміщають в пробірки, що містять культуральне середовище. Потім трубки інкубують стандартний час при стандартній температурі. У другій методиці виміряний обсяг проби пропускають через фільтр тонкого очищення, який затримує бактерії. Потім фільтр поміщають на культуральне середовище і інкубують. Це називається технікою мембранного фільтра.

Техніка багаторазового бродіння труб

Методика використовується для аналізу питної води протягом багатьох років з задовільними результатами. Це єдина процедура, яка може бути використана, якщо проби води дуже каламутні або якщо слід проаналізувати напівтверді речовини, такі як відкладення або мул. Процедура, яку дотримується, є основоположною для бактеріологічних аналізів, і тест використовується в багатьох країнах. Прийнято повідомляти про результати багаторазового бродіння пробірки для кишкової палички як показник найбільш ймовірного числа (MPN). Це індекс кількості бактерій кишкової палички, які, швидше за все, ніж будь-яке інше число, дали б результати, показані тестом. Це не підрахунок фактичної кількості бактерій індикаторів, присутніх у зразку.

Окремі аналізи зазвичай проводяться на п'яти порціях трьох серійних розведень проби води. Окремі порції використовуються для інокуляції пробірки культурального середовища, які інкубуються при стандартній температурі протягом стандартного періоду часу. Про наявність коліформ свідчить помутніння в живильному середовищі, зміна рН і/або наявність газу. Індекс MPN (найбільш ймовірне число) визначається шляхом порівняння картини позитивних результатів (кількості пробирок, що показують зростання при кожному розведенні) зі статистичними таблицями. Табличне значення повідомляється як MPN на 100 мл зразка. Існує ряд варіантів для техніки багаторазового бродіння труб. Найпоширенішою процедурою є обробка п'яти аліквот води з трьох послідовних 10-кратних розведень; наприклад, п'ять аліквот зразка (аліквота - це частина більшого цілого), п'ять розведення зразка 1/10 та п'ять розведення 1/100. Аліквоти можуть бути об'ємом 1 мл, кожен з яких додається до 10 мл одномісного культурального середовища, або об'ємом 10 мл, кожен з яких додається до 10 мл середовища подвійної міцності.

Кожна частина тесту вимагає різного типу середовища. Наприклад, при перерахуванні кишкової палички в першій (ізольованої або передбачуваної) частини тесту використовують відвар лаурилтриптозу (лактози). У другій (підтверджуючої) частині відвар жовчі з діамантовою зеленою лактозою (BGLB) використовується для підтвердження загальної кількості кишкової палички та середовища кишкової палички для підтвердження фекальних коліформ.

Техніка мембранного фільтра

Методика мембранного фільтра може бути використана для тестування відносно великої кількості зразків і дає результати швидше, ніж техніка багаторазового бродіння труб. Спочатку він був розроблений для використання в лабораторії, але тепер доступне портативне обладнання, яке дозволяє використовувати техніку в польових умовах.

Метод мембранного фільтра дає прямий підрахунок загальної кількості кишкової палички та фекальної кишкової палички, присутніх у даній пробі води. Виміряний об'єм води фільтрується під вакуумом через мембрану ацетату целюлози рівномірного діаметра пор, як правило, 0,45 мкм. Бактерії затримуються на поверхні мембрани, яка поміщається на відповідне селективне середовище в стерильному контейнері і інкубується при відповідній температурі. Якщо в зразку води присутні кишкові палички та/або фекальні кишкові палички, утворюються характерні колонії, які можна підрахувати безпосередньо.

Техніка непридатна для природних вод, що містять дуже високий рівень зважених матеріалів, мулу та відкладень. Кожна обставина може блокувати фільтр до того, як пройде достатній обсяг води. Коли необхідно випробувати невеликі кількості зразка (стічні стоки або грубо забруднені поверхневі води), необхідно розвести частину зразка в стерильному розріджувачі, щоб переконатися, що достатній обсяг для фільтрації присутній по всій поверхні мембрани.

Якщо сумніви щодо ймовірної щільності бактерій існують, доцільно протестувати два і більше обсягів, щоб переконатися, що кількість колоній на мембрані буде знаходитися в оптимальному діапазоні для підрахунку (20-80 колоній на мембрану). Якщо відповідний обсяг зразка не може бути відфільтрований через одну мембрану, зразок може бути відфільтрований через дві або більше мембран та кількість колоній на мембранах, доданих, щоб дати загальну кількість для зразка.

Методи мембранної фільтрації та підрахунку колоній припускають, що кожна бактерія, скупчення бактерій або частка з приєднаними бактеріями призведе до появи однієї видимої колонії. Отже, кожна грудка або частка є колонієутворюючою одиницею (КУО), а результати виражаються у вигляді колонієутворюючих одиниць на одиницю об'єму. У разі термостійких бактерій кишкової палички результат слід повідомляти як термостійкі кишкові палички [№] КУО на 100 мл.

Для дослідження сирих або частково очищених вод передбачувані результати можуть бути адекватними, але за певних обставин важливо проводити підтверджуючі тести на чистих субкультурах. Для підтвердження результатів мембрани для загальних коліформ кожну колонію (репрезентативну кількість колоній) субкультивують у пробірки з лактозно-пектоновою водою і інкубують при 35 або 37° C протягом 48 годин. Видобуток газу в цей період підтверджує наявність загальних коліформ. Щоб підтвердити термостійкі кишкові палички та кишкову паличку на мембранах, інкубуваних при 35, 37 або 44° C, кожну колонію (репрезентативну кількість колоній) субкультивують у трубку лактозної пептонної води та трубку триптонової води. Пробірки інкубують при температурі 44° C протягом 24 годин. Зростання з виробленням газу в лактозно-пептонной воді підтверджує наявність термостійких кишкових паличок. Підтвердження кишкової палички вимагає додавання 0,2-0,3 мл реагенту Коваца в кожну культуру триптонової води. Вироблення червоного кольору свідчить про синтез індолу з триптофану і підтверджує наявність кишкової палички. Застосування лаурилтриптозного відвару манітолу з триптофаном дозволяє продемонструвати газоутворення та синтез індолу в одній трубці.

Малюнок\(\PageIndex{5}\): Техніка мембранного фільтра - зображення EPA знаходиться у відкритому доступі

Переглянути питання

1. Опишіть біоплівку.
2. Бактеріологічно, до чого відноситься термін коліформи?
3. Опишіть техніку багаторазового бродіння труб для культивування бактерій кишкової палички.
4. Опишіть хімічно визначене середовище.

Розділ Вікторина

1. Живильний матеріал, підготовлений для росту мікроорганізмів в лабораторії, називається a (n) ___________.
   1. Середовище збагачення
   2. Культурне середовище
   3. Вибіркові носії
   4. Комплексні засоби масової інформації
2. ___________ призначений для придушення росту небажаних бактерій і стимулювання зростання потрібного мікроба.
   1. Середовище збагачення
   2. Культурне середовище
   3. Вибіркові носії
   4. Комплексні засоби масової інформації
3. Бактерії в невеликій кількості можуть бути пропущені, особливо якщо інші бактерії присутні в більшій кількості. З цієї причини необхідно використовувати a (n) ___________.
   1. Середовище збагачення
   2. Культурне середовище
   3. Вибіркові носії
   4. Комплексні засоби масової інформації
4. Більшість досліджень мікробів вимагають чистої культури або клонів бактерій. Метод ізоляції, який використовується для досягнення чистих культур, - це ___________.
   1. Вибірковий відбір
   2. Метод смугастої пластини
   3. метод щеплення
   4. Метод визначеного середовища
5. Термін ___________ відноситься (и) до великої групи грамнегативних, стрижнеподібних бактерій, які мають кілька характеристик. До групи належать термостійкі бактерії фекального походження.
   1. Вірус
   2. Найпростіші
   3. Паразит
   4. Загальна кількість кишкових паличок
6. Ця методика ідентифікації коліформ є єдиною процедурою, яка може бути використана, якщо зразки води дуже каламутні або якщо слід проаналізувати напівтверді речовини, такі як відкладення або мул. Процедура, яку дотримується, є основоположною для бактеріологічних аналізів, і тест використовується в багатьох країнах. Про результати прийнято повідомляти як показник найбільш ймовірного числа (MPN).
   1. Техніка багаторазового бродіння труб
   2. Техніка мембранного фільтра
   3. Гетеротрофний підрахунок пластин
   4. Сабуро
7. ___________ припустимо, що кожна бактерія, скупчення бактерій або частка з приєднаними бактеріями дасть початок одній видимій колонії. Отже, кожна грудка або частка є колонієутворюючою одиницею (КУО), а результати виражаються у вигляді колонієутворюючих одиниць на одиницю об'єму. У разі термостійких бактерій кишкової палички результат слід повідомляти як термостійкі кишкові палички [№] КУО на 100 мл.
   1. Техніка багаторазового бродіння труб
   2. Техніка мембранного фільтра
   3. Гетеротрофний підрахунок пластин
   4. Сабуро
8. Сульфіт вісмуту пригнічує грампозитивні бактерії та більшість грамнегативних кишкових бактерій. ___________ агар має рН 5,6 і використовується для виділення грибів, які переростають бактерії.
   1. Техніка багаторазового бродіння труб
   2. Техніка мембранного фільтра
   3. Гетеротрофний підрахунок пластин
   4. Сабуро
9. ___________ підрахунок включає мікроорганізми, які здатні рости в або на багатій поживними речовинами твердому агаровому середовищі. Використовуються дві інкубаційні температури і час. Вони становлять 37° C протягом 24 годин, щоб стимулювати ріст бактерій походження ссавців, і 22° C протягом 72 годин для перерахування бактерій, отриманих головним чином з джерел навколишнього середовища.
   1. Техніка багаторазового бродіння труб
   2. Техніка мембранного фільтра
   3. Гетеротрофний підрахунок пластин
   4. Сабуро
10. Більше 95 відсотків термостійких кишкових паличок, виділених з води, є організмом кишечника, ___________, наявність якого є остаточним доказом фекального забруднення.
    1. стрептокок
    2. кишкова паличка
    3. Стафілокок
    4. Бактероїди