Skip to main content
LibreTexts - Ukrayinska

16.5: Мікро-звіт 4- Аналіз доповнення

  1. Last updated
  2. Save as PDF
  • Page ID
    4180

    • \( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)

    Малюнок: Фігура в основі цього мікрозвіту - багатопанельна фігура, на якій зображені репліки пластин деформацій, які були перетворені плазмідами надмірної експресії. Зверніться до вказівок щодо мікро-звіту 1, щоб дізнатися, як налаштувати цифри з декількома панелями.

    Матеріали та методи: Надайте інформацію про процедури перетворення та покриття реплік, а також про засоби масової інформації, що використовуються в експериментах. Коли це можливо, зверніться до лабораторного посібника, зазначивши будь-які зміни, які ви внесли в процедури.

    Штами та плазміди: Див. Мікрозвіти 1 і 3.

    Медіа: Див мікро-звіт 1.

    Трансформація: Хтось, хто намагається відтворити ваші результати, повинен знати подробиці про процедуру трансформації, оскільки ефективність трансформації сильно варіюється і демонструє сильну залежність від реагентів та умов інкубації. Ви можете звернутися до посібника з лабораторії.

    Покриття репліки: Це стандартна процедура. Ви також можете звернутися до посібника з лабораторії.

    Результати та обговорення: Ваша фігура з відсканованими пластинами є фокусною точкою цього розділу. Включіть єдину таблицю даних, яка з розрахунковою ефективністю перетворення з кожною плазмідою і здатністю перетворених деформацій (Y/N або +/-) рости на різних пластин репліки. Ефективність трансформації повинна виражатися в кількості трансформованих клітин/мкг плазмідної ДНК.

    Розділ R & D повинен розповісти історію про те, як пластини репліки дозволили вам вирішити, чи зберігається ваш білок
    Met між двома видами дріжджів. Можливо, ви спостерігали або не спостерігали доповнення. Недотримання доповнення не обов'язково пов'язано з експериментальною помилкою. (Які пластини служать контролем проти експериментальної помилки?) Комплементація - це функціональний аналіз, який залежить як від експресії злитого білка, так і від здатності злитого білка каталізувати реакцію в біосинтезі Мет. Злиті білки мають великі C-термінальні розширення, які можуть вплинути на їх нормальні ферментативні функції. Негативні результати можуть бути настільки ж важливими, як і позитивні результати в просуванні наукового розуміння.

    Якщо ви не спостерігали доповнення, обговоріть можливі причини того, що це могло статися, і запропонуйте майбутні експерименти, які могли б допомогти відповісти на ці питання. Можливо, ви захочете запропонувати нові плазмідні конструкції для додаткових експериментів. Ви також можете залучити інформацію з аналізів BLASTP. (Що таке значення Е?) Обов'язково включіть достатньо обґрунтування, що запропоновані вами експерименти нададуть корисні дані.