14.4: Фарбування гелів SDS-PAGE
- Page ID
- 4604
\( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)
- Вимкніть блок живлення.
- Вийміть гелевий апарат з бака. Відкрийте затискну рамку і видаліть гелевий сендвіч cas- sette. Акуратно розчешіть шпателем дві пластини один від одного. Шпателем видаліть нижній правий або лівий кут гелю, щоб він служив маркером орієнтації. Обов'язково вкажіть у своїй лабораторній зошиті, чи відповідає зубчастий кут смузі 1 або смузі 10 гелю. Ви також можете видалити гель для укладання за допомогою шпателя, якщо хочете.
- Помістіть гель в невеликий пластиковий лоток і позначте лоток своїми ініціалами на шматочку стрічки. Для цього потрібно заповнити лоток приблизно наполовину деіонізованою водою. Акуратно звільніть гель від скляної пластини, дозволивши йому ковзати у воду. Гель повинен вільно переміщатися у воді. Помістіть гель і лоток на качалку платформу. Розкачайте гель протягом ~2 хвилин.
- Злийте воду з гелю і додайте достатньо Simply Blue, щоб покрити гель, дозволяючи гелю вільно рухатися при розгойдуванні лотка. Накрийте ємність з гелем саран-обгорткою і качайте на ніч. Слідкуйте за тим, щоб гель не прилипав до дна лотка.
- Вранці злийте пляму Simply Blue у відповідний маркований контейнер для відходів у витяжці лабораторної кімнати.
- Затримайте гель, заповнивши ємність приблизно наполовину деіонізованою водою. Збовтайте гель у воді протягом ~2 хвилин. Злийте воду і додайте нову деіонізовану воду. Повторюйте, якщо необхідно, поки не стануть помітні білкові смуги.
- Коли окремі смуги виявляються, запишіть свої дані. Ви можете сфотографувати гель за допомогою камери мобільного телефону на білому тлі. Крім того, помістіть гель у прозорий пластиковий протектор сторінки та відскануйте гель.
- Після запису даних викиньте гель у контейнер для відходів Biohazard.