8.5: Забарвлення та аналіз гелю агарози
- Page ID
- 4887
\( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)
При фарбуванні гелів надягайте одноразові рукавички. Рукавички важливі при роботі з інтеркаляційними барвниками, які є потенційними мутагенами.
- Зніміть гель з апарату і перенесіть гель в невелику ванночку. Покрийте гель деіонізованою водою. Додайте в лоток 5 мкл розчину ETBr (10 мг/мл). Яка приблизна концентрація ЕтБР в фарбувальному розчині?
- Помістіть лоток на качалку платформу і акуратно качайте протягом 20-30 хвилин.
- Злийте розчин ETBR у відповідний контейнер для відходів у витяжному ковпаку.
- Покрийте гель деіонізованою водою і обережно качайте протягом 1 хвилини.
- Шпателем акуратно покладіть гель на трансилюмінатор і закрийте кришку на апарат Gel- Logic. (Злити миючий розчин в контейнер для відходів.)
- Увімкніть світло транссілюмінатора і сфотографуйте гель відповідно до викладеної інструкції. Вимкніть трансілюмінатор відразу після того, як ви сфотографуєте гель. Збережіть картинку і надішліть копію по електронній пошті собі. (Якщо смуг не видно, фарбування можна повторювати протягом більш тривалого періоду часу.)
- Відкрийте дверцята апарату GelLogic. Використовуйте шпатель, щоб перенести гель на відходи con- tainer, встановлений для ETBR забарвлених гелів.
- Визначте приблизну довжину молекул ДНК у ваших зразках, порівнявши їх міграцію з міграцією стандартів. Чи відповідають розміри вашим очікуванням?