Skip to main content
LibreTexts - Ukrayinska

8.5: Забарвлення та аналіз гелю агарози

  • Page ID
    4887
  • \( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)

    ПРИМІТКА З БЕЗПЕКИ:

    При фарбуванні гелів надягайте одноразові рукавички. Рукавички важливі при роботі з інтеркаляційними барвниками, які є потенційними мутагенами.

    1. Зніміть гель з апарату і перенесіть гель в невелику ванночку. Покрийте гель деіонізованою водою. Додайте в лоток 5 мкл розчину ETBr (10 мг/мл). Яка приблизна концентрація ЕтБР в фарбувальному розчині?
    2. Помістіть лоток на качалку платформу і акуратно качайте протягом 20-30 хвилин.
    3. Злийте розчин ETBR у відповідний контейнер для відходів у витяжному ковпаку.
    4. Покрийте гель деіонізованою водою і обережно качайте протягом 1 хвилини.
    5. Шпателем акуратно покладіть гель на трансилюмінатор і закрийте кришку на апарат Gel- Logic. (Злити миючий розчин в контейнер для відходів.)
    6. Увімкніть світло транссілюмінатора і сфотографуйте гель відповідно до викладеної інструкції. Вимкніть трансілюмінатор відразу після того, як ви сфотографуєте гель. Збережіть картинку і надішліть копію по електронній пошті собі. (Якщо смуг не видно, фарбування можна повторювати протягом більш тривалого періоду часу.)
    7. Відкрийте дверцята апарату GelLogic. Використовуйте шпатель, щоб перенести гель на відходи con- tainer, встановлений для ETBR забарвлених гелів.
    8. Визначте приблизну довжину молекул ДНК у ваших зразках, порівнявши їх міграцію з міграцією стандартів. Чи відповідають розміри вашим очікуванням?