1.5: Налаштування мікроскопа та слайда належним чином

Всі мікроскопи в лабораторії є парфокальними. Це означає, що якщо слайд знаходиться у фокусі під однією метою, він буде залишатися значною мірою у фокусі, якщо мета буде змінена. У практичному плані це означає, що зазвичай потрібно використовувати ручку грубого фокусування лише один раз на слайд. Ви отримуєте слайд у фокусі під об'єктом найнижчої потужності (де фокусування найпростіше), потім, з цього моменту, лише вносите незначні корективи за допомогою тонких ручок фокусування, навіть якщо ви змінюєте цілі.

Коли ви вперше отримуєте новий слайд, ви зазвичай можете визначити місце розташування зразка, дивлячись на слайд, поки він ще знаходиться у вашій руці. Зразок зазвичай являє собою пляму кольору десь біля центру покривного ковзання. Після того, як ви надійно закріпіть слайд на сцену за допомогою сценічних затискачів, використовуйте ручки управління сценою, щоб перемістити кольорову пляму, поки вона не опиниться безпосередньо над отвором у центрі сцени, куди потрапляє світло. Тепер, коли ви переглядаєте окуляри, використовуючи найнижчу мету (завжди починайте з найнижчої мети), ви повинні мати можливість знайти зразок і швидко отримати його у фокусі.

Іноді окуляр або лінзи об'єктива матимуть плями бруду або пилу на них, що ускладнює зосередження уваги на зразку. Для очищення лінз завжди використовуйте папір для лінз, що постачається інструктором лабораторії, або чистим ватним тампоном. Не використовуйте будь-який інший тип тканини або паперу, оскільки вони можуть подряпати лінзу. KimWipes НЕ є папером для лінз, НІКОЛИ не використовуйте KimWipes на скляних лінзах або слайдах. Щоб видалити бруд за допомогою паперу для лінз, спочатку згорніть папір для лінз і спробуйте висушити щіткою бруд спіралеподібним рухом, який кружляє від центру лінзи. Якщо це не спрацює, змочіть папір для лінз або чистий ватний тампон синім розчином для чищення лінз (не наносите воду безпосередньо на лінзу) і очистіть спіралеподібним рухом від центру лінзи назовні.

Нижче наведено контрольний список для початкової настройки мікроскопа. Кожен раз, коли ви отримуєте новий слайд, ви повинні використовувати цей контрольний список.

Лабораторія 1 Вправа\(\PageIndex{1}\)

1. Підключіть мікроскоп і увімкніть джерело світла.

2. Візьміть мікроскоп, несучи руку, розташуйте його так, щоб він був доступний для вашого сидіння, з відкритою стороною сцени, зверненою до вас

3. Поверніть цілі так, щоб найменша потужність об'єктиву (найменший за розміром) клацала на місце.

4. Подивіться на слайд неозброєним оком і знайдіть місце розташування екземпляра.

5. Закріпіть слайд на місце за допомогою сценічних затискачів. Накладка кришки на гірці повинна бути звернена вгору. Знайдіть елементи управління сценою і переконайтеся, що при їх повороті слайд плавно переміщається вліво і вправо або вгору-вниз, в залежності від ручки.

6. Використовуйте елементи управління сцени, щоб перемістити слайд так, щоб джерело світла світило безпосередньо на зразок, який потрібно збільшити.

7. Знайдіть грубі та тонкі ручки фокусування. Спостерігаючи за сценою та об'єктом, використовуйте ручку грубого фокусування, щоб наблизити ціль низької потужності до слайда, як він піде.

8. Покладіть око до окуляра (або окулярів, якщо мікроскоп бінокулярний) і поверніть ручку грубого фокусування в напрямку опускання, поки якийсь аспект зразка не потрапить у фокус.

9. Перемістіть руку до тонкої ручки фокусування і зробіть зразок ідеальним фокусом для ваших очей. НЕ торкайтеся регулятора грубого фокусування знову.

10. Використовуйте ручки управління сценою, щоб перемістити ваш зразок близько до точного центру вашого поля зору

11. Перейдіть до наступної мети найвищої потужності (не пропускайте окремі цілі) і використовуйте лише тонкий фокус, щоб зробити ваше зображення ідеальним фокусом для ваших очей.

12. Якщо вам потрібно подальше збільшення, перейдіть до наступної мети найвищої потужності та використовуйте лише тонкий фокус, щоб ваше зображення було ідеальним фокусом для ваших очей.

13. Не використовуйте 100x мета (якщо у вас є) в цьому курсі. Його потрібно використовувати з занурювальним маслом, і ми не будемо мати студентів, які це роблять.

Чим віртуальний образ відрізняється від реального зображення

Віртуальне зображення, яке ви бачите, дивлячись у свій мікроскоп, не зовсім таке ж, як реальне зображення, яке ви бачили б своїм оком. З одного боку, вона більша. З іншого боку, орієнтація зображення різна. Дві лінзи в складному мікроскопі відображають оригінальне зображення два рази, у двох різних площинях, збільшуючи його. Отже, те, що ви думаєте про «вершину» вашого зображення, насправді є нижньою, а те, що ви думаєте про «право», насправді ліве. Зазвичай це не питання на мікроскопічному рівні, але важливо розуміти, як мікроскоп переставляє ваше віртуальне зображення.

Лабораторія 1 Вправа\(\PageIndex{2}\)

1. Отримайте слайд «е». Якщо він вже знаходиться під мікроскопом, поверніть об'єкт з найменшою потужністю на місце, використовуйте грубий фокус, щоб опустити сцену та видалити слайд.
2. Подивіться на незбільшену «е» на слайді на око. Поверніть слайд навколо в руці так, щоб «е» була правою стороною вгору. Тепер закріпіть слайд на сцену мікроскопа за допомогою сценічних кліпів так, щоб «е» було звернено до вас правою стороною вгору, коли ви дивитеся на нього неозброєним оком.
3. У правому колі внизу намалюйте, як виглядає «е», коли ви дивитеся на нього правою стороною вгору. Припустимо, що коло нижче - це розмір всього обкладинкиковзання. Намалюйте «е», яке ви бачите без сторонньої допомоги, у правильній пропорції до ковзання обкладинки. (Незбільшене «е» займе крихітну частину області ковзання.)

   

4. Закріпіть слайд у сцену мікроскопа так, щоб «е» все ще звернено до вас правою стороною вгору. Дотримуйтесь контрольного списку в Lab 1 Вправа 1-7, щоб переконатися, що ви налаштовуєте мікроскоп належним чином для використання, але залишайтеся на найнижчій потужності мети. Отримайте «е» у своє поле зору та у фокусі.
5. У лівому колі вище намалюйте, як виглядає «е» при перегляді його через мікроскоп під об'єктом найменшої потужності. Під колом напишіть сумарне збільшення зображення.
6. При огляді під мікроскопом, як обертається зразок?
7. Подивіться на сцену і ковзайте прямо (не через окуляри.) Перемістіть ручку управління сценою, яка змушує слайд відійти від вас на сцені, а потім поверніть його назад у вихідне положення.
8. Тепер рухайте ручку управління сценою точно так само, як ви тільки що зробили, але перегляньте «е» через окуляр. Коли сцена відходить від вас, в якому напрямку віртуальний образ, здається, рухається?
9. Знову подивіться на сцену і ковзайте прямо (не через окуляр.) Цього разу перемістіть ручку управління сценою, яка змушує слайд рухатися вправо, а потім поверніть його назад у вихідне положення.
10. Тепер рухайте ручку управління сценою точно так само, як ви тільки що зробили, але перегляньте «е» через окуляр. Коли сцена рухається праворуч від вас, в якому напрямку віртуальне зображення, здається, рухається?
11. Поле зору - це вся область, яку ви можете побачити, дивлячись через окуляр. Використовуйте ручки управління сценою, щоб перемістити віртуальне зображення вашого «е» в одну сторону поля зору. Зберігайте більшу частину «е» в поле зору, але перемістіть її в ту чи іншу сторону.
12. Тепер перейдіть до мети наступної потужності. (Не пропускайте.) Щоб дістатися до мети наступної сили, а не до мети найвищої сили, яким чином вам довелося обертати цілі, за годинниковою стрілкою або проти годинникової стрілки?
13. Використовуючи лише ручку тонкого фокусування (ви НЕ використовуєте ручку грубого фокусування на будь-якому об'єкті, крім найнижчої мети), отримайте «е» у фокусі.
14. При переході до наступної мети, яку частину поля зору ви збільшуєте масштаб?
15. Відійдіть від окулярів і подивіться на відстань між слайдом і нижньою частиною об'єктиву. Поверніть назад до мети найнижчої потужності. Тепер поверніть до наступної мети (не обертайте до мети найвищої потужності випадково). Тепер поверніться до третьої за висотою мети. Що відбувається з відстанню між слайдом і нижньою частиною об'єкта, коли ви обертаєте до цілей вищої потужності?
16. Коли третя найвища мета потужності все ще на місці, скільки місця між слайдом та нижньою частиною об'єкта?
17. Зверніть увагу, що існує небезпека розбити об'єктив об'єктиву в слайд, якщо ви повинні були використовувати грубий фокус. Чому вам доручено використовувати грубий фокус лише з метою найнижчої потужності?
18. Малюйте лише те, що насправді бачите. Навіть якщо ви очікуєте побачити щось, якщо його там немає, ви не повинні це малювати. Не базуйте свої малюнки на тому, що підручник або будь-яке інше джерело говорить вам, що повинні бути там. Не малюйте речі у формах, які тексти чи інші джерела повідомляють вам очікувати, якщо ви насправді не бачите цих фігур.

Створення простих, але точних креслень ліній збільшених зразків

Не потрібно бути великим художником, щоб скласти діаграму клітин і структур, які ви бачите під мікроскопом. Вам потрібно лише бути обережним, щоб намалювати щось приблизно такого ж розміру та форми, як і те, що ви бачите. Дотримуйтесь наступних рекомендацій:

1. Малюйте лише те, що насправді бачите. Навіть якщо ви очікуєте побачити щось, якщо його там немає, ви не повинні це малювати. Не базуйте свої малюнки на тому, що підручник або будь-яке інше джерело говорить вам, що повинні бути там. Не малюйте речі у формах, які тексти чи інші джерела повідомляють вам очікувати, якщо ви насправді не бачите цих фігур.
2. Тримайте речі максимально простими. Намалюйте сильні нерозривні лінії. Уникайте затінення або перехресного штрихування, якщо немає дуже вагомих причин для їх додавання.
3. Сміливо спрощуйте реальність, залишаючи непотрібні деталі. Намалюйте те, що цікавить, але залиште фоновий матеріал, сміття або будь-які інші відволікаючі елементи. Просто будьте обережні, якщо ви залишаєте щось поза, що це не те, що є важливою частиною того, що ви малюєте.

Ви завжди повинні мати базове розуміння того, що ви шукаєте, перш ніж дивитися в мікроскоп. Тканини та інші мікроскопічні зразки можуть бути заплутаними і захаращеними. Якщо ви знаєте в цілому, що шукаєте, і, що ще важливіше, те, чого ви не шукаєте, це значно полегшить пошук того, що ви хочете намалювати, і це значно полегшить вирішення питання про те, як його намалювати.

Тільки пам'ятайте, що те, що ви бачите під мікроскопом, може виглядати зовсім не так, як ідеальні зразки, які зазвичай зустрічаються на малюнках, розміщених в підручниках і веб-сайтах. Використовуйте ідеалізовані зображення, щоб відстежувати те, що ви шукаєте, але намалюйте зразок таким, яким він є насправді, незалежно від ваших очікувань.

Наприклад, у більшості підручників нейрони, найпоширеніші клітини, знайдені в нервовій тканині, малюються так, щоб виглядати як варіації малюнка на малюнку\(\PageIndex{1}\) А.

Малюнок\(\PageIndex{1}\): А. Типова діаграма нейрона. Б. фактичний нейрон. (Ліворуч CC-BY-SA, Джонатан Хаас, Вікімедіа, Праворуч CC-BY, У. Клей Спенсер, Ребекка МакВіртер, Тайн Міллер, Пніна Страсбургер, Оуен Томпсон, ЛаДіана Хіллієр, Роберт Х. Уотерстон, Девід Міллер II I)

У типовій діаграмі нейрона, яка з'являється в текстах та на веб-сайтах, зазвичай є чітке ядро, і часто видиме ядерце. Іноді видно такі органели, як мітохондрії (їх немає на малюнку\(\PageIndex{1}\) А) Дендрити, як правило, короткі і розгалужені. Майже завжди є єдиний, легко ідентифікований аксон, який довший за всі дендрити і який розгалужується, коли він закінчується.

На малюнку\(\PageIndex{1}\) В показано фактичний нейрон, розглянутий через мікроскоп. Якщо ви переглядаєте достатню кількість нейронів через достатньо різних типів мікроскопів, ви можете в кінцевому підсумку створити складову діаграму, яка включає функції багатьох зразків, щоб представити «типовий» нейрон, але навряд чи, якщо ви переглянете один нейрон, ви побачите все на малюнку\(\PageIndex{1}\) А. фактичні екземпляри дуже мало схожі на їх підручники. Малюйте те, що бачите, а не те, що, на вашу думку, ви повинні бачити. Просто переконайтеся, що ви дивитеся на те, що ви повинні знайти (наприклад, нейрон, а не шматок бруду або сміття клітин), а потім намалюйте його як є.

У випадку фактичного нейрона на малюнку\(\PageIndex{1}\) В, ядра не видно, можливо, є одна велика проекція і одна маленька проекція, яку можна назвати дендритами - але проекцій не так багато - і жодна проекція не розгалужена. Є одна довга тонка проекція, яка, ймовірно, є аксоном, і вона не розгалужена.

Якщо ви малюєте те, що бачите, ви отримаєте малюнок, подібний до малюнка 1.14B. Він не схожий на хрестоматійний нейрон, але є розумним уявленням про те, що є в даному випадку.

Малюнок\(\PageIndex{2}\): Фактичний нейрон. (Ліворуч CC-BY-SA, Джонатан Хаас, Вікімедіа, Праворуч CC-BY, У. Клей Спенсер, Ребекка МакВіртер, Тайн Міллер, Пніна Страсбургер, Оуен Томпсон, ЛаДіана Хіллієр, Роберт Х. Уотерстон, Девід Міллер II I)

Більшість студентів відчувають, що вони «не можуть малювати» і неохоче замальовують те, що вони бачать під мікроскопом. Ви не дозволяєте вашій відсутності художніх навичок зупинити вас.

1. Намалюйте контур, який наближається до елемента, який ви хочете намалювати. Не одержимий тим, щоб зробити його ідеально відповідним. Приблизний - це нормально.
2. Постарайтеся, щоб пропорції вийшли приблизно правильними. Якщо щось наполовину менше, або третє, як велике, як щось інше, зробіть це так само на малюнку.
3. Не малюйте все, що бачите. Поліпшуйте реальність, лише намалювавши частини цікавить вас зразка. Вам не доведеться малювати кожен шматочок сміття або бруду. Вирішіть, які важливі частини вашого екземпляра, і намалюйте тільки ті.
4. Не використовуйте затінення або перехресне штрихування, якщо для цього немає дуже вагомих причин. Це насправді полегшить розуміння вашого малюнка, якщо ви будете дотримуватися малювання лише контурів. Так само буде простіше і швидше малювати.

Лабораторія 1 Вправа\(\PageIndex{3}\)

1. Отримайте слайд мазка крові людини. Поверніть свою найнижчу потужність об'єктиву на місце на мікроскопі.

2. Дотримуйтесь контрольного списку в Лабораторних\(\PageIndex{1}\) вправах, поки ви не переглядаєте мазок крові під вашою 40x метою.

3. Ви побачите в основному еритроцити. Вони, ймовірно, будуть рожевими і це будуть кола без ядер. Іноді деякі, здається, мають порожні кола в своїх центрах, але це не ядра. Якщо ви будете шукати навколо слайда за допомогою елементів керування сценою, ви знайдете рідкісні кругові клітини з ядрами. Це лейкоцити. На кожні 100 еритроцитів буде менше одного лейкоцита. Ці лейкоцити, ймовірно, будуть світло-блакитними або сірими і мають фіолетові або темно-сині ядра. Їх ядра не завжди будуть круглими.

4. Знайдіть розділ вашого слайда з двома або більше білими кров'яними клітинами серед усіх еритроцитів.

5. У колі нижче намалюйте чотири-п'ять представницьких еритроцитів (не малюйте всі червоні кров'яні тільця, які ви бачите) і намалюйте всі лейкоцити в своєму полі зору. Приділіть пильну увагу малюванню ядер лейкоцитів максимально точно.

 

6 Не знімайте і не змінюйте положення слайда, поки один з ваших партнерів лабораторії не переконається, що ваші лейкоцити намальовані точно. Уявіть себе партнеру і попросіть їх допомоги.

ЛІЦЕНЗІЇ ТА АВТОРСТВА

CC ЛІЦЕНЗОВАНИЙ КОНТЕНТ, ОРИГІНАЛ

Лабораторії A&P. Автор: Росс Уітуем. Надано: Університет Міссісіпі для жінок. Знаходиться за адресою: http://www.muw.edu/. Ліцензія: CC BY-SA: Із Зазначенням Авторства

Малюнок\(\PageIndex{1}\) Б. Малюнок нейрона малюнка Фігури\(\PageIndex{1}\) А.. Автор: Росс Уітуем. Надано: Університет Міссісіпі для жінок. Знаходиться за адресою: http://www.muw.edu. Ліцензія: CC BY-SA: Із Зазначенням Авторства

CC ЛІЦЕНЗОВАНИЙ КОНТЕНТ, РАНІШЕ ДІЛИВСЯ

Малюнок\(\PageIndex{2a}\). Типова діаграма нейрона.. Автор: Джонатан Хаас. Знаходиться за адресою: https://commons.wikimedia.org/w/inde...curid=18271454. Ліцензія: CC BY-SA: Із Зазначенням Авторства

CC ЛІЦЕНЗОВАНИЙ ВМІСТ, СПЕЦИФІЧНА АТРИБУЦІЯ

Малюнок\(\PageIndex{2b}\) А. Фактичний нейрон; Малюнок\(\PageIndex{1}\) B. Фактичний нейрон. Автори: У. Клей Спенсер, Ребекка МакВіртер, Тайн Міллер, Пніна Страсбургер, Оуен Томпсон, ЛаДіана Хілліер, Роберт Уотерстон, Девід Міллер III. Знаходиться за адресою: http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0112102. Ліцензія: CC BY: Зазначення авторства

При зберіганні мікроскопа завжди слід дотримуватися такого списку:

 

1. Видаліть будь-який слайд, знайдений на сцені, і поверніть його в поле слайдів.
2. Поверніть найменшу лінзу або відсутність об'єктива на місце над сценою. Опустіть ступені на кілька оборотів.
3. Нещільно намотайте шнур в руці, починаючи біля мікроскопа і працюючи до вилки.
4. Повісьте намотаний шнур над однією очною лінзою.
5. Подивіться на цифру на задній панелі мікроскопа, поверніть цю область в його пронумеровану коробку.

6. Якщо в цій пронумерованій коробці вже є мікроскоп, перевірте його номер і перемістіть його. Якщо він не пронумерований, просто натисніть його на задню частину коробки і помістіть свій ближче до передньої частини. У нас є кілька додаткових мікроскопів, які ми зберігаємо таким чином.

Малюнок\(\PageIndex{3}\): Бінокулярний мікроскоп. (CC-BY-SA; Росс Уітуем http://www.muw.edu/)